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Etude de sensibilité de streptococcus mutans aux extraits totaux de khaya nyasica

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par Dieumerci DISADILA
Université de Lubumbashi ( UNILU ) République démocratique du Congo - Docteur en sciences pharmaceutiques 2013
  

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IV.2.3. Obtention des extraits végétaux

Pour préparer et obtenir nos extraits totaux, nous avons eu à peser 10g pour chaque partie utilisée (la racine, l'écorce de tige, les fruits et les feuilles) que nous avons macéré à 100ml du méthanol et laisser reposer pendant 48 heures à l'air libre, prendre ce marc, filtré, sécher à l'air libre à l'aide d'un Erlenmeyer pendant 24 heures puis mettre à l'étuve pendant 72 heures jusqu'à l'obtention des extraits secs, racler à l'aide d'une spatule et peser les extraits ainsi obtenu pour calculer le rendement et enfin conditionner.

IV.2.4. Screening chimique

C'est une technique chimique qui permet de déterminer les différents groupes chimiques contenus dans un organe végétal.

Ce sont des réactions physico chimiques qui permettent d'identifier la présence des substances chimiques naturelles.

Si un extrait végétal est pourvu d'une activité c'est qu'il renferme des groupes chimiques actifs qui sont responsables de son activité.

La plante Khaya nyasicaa ainsi fait l'objet de notre analyse phytochimique. Les groupes chimiques recherchés sont :

- Alcaloïdes,

- Flavonoïdes,

- Tanins,

- Terpénoides,

- Stéroïdes,

- Saponines

- Quinones

- Hétérosides cyanogénétiques.

IV.2.4.1. PREPARATION DES REACTIFS

A. REACTIFS DES ALCALOIDES

1. Réactifs de Dragendorff

Solution A : Dissoudre 0,85g de nitrate de bisrnuth dans 10 ml d'acide acétique glacial et 40 ml d'eau distillée.

Solution B : Dissoudre 8g d'iodure de potassium dans 20 ml d'eau distillé. Prélever 5 ml de la solution A et 5 ml de la solution B que l'on met dans un ballon de 100 ml. Ajouter 20 ml d'acide acétique et compléter la solution avec de l'eau distillée jusqu'au trait de jauge (15).

2. Réactifs de Mayer

Déposer 13,55 g de chlorure de mercure et 50 g d'iodure de potassium dans un ballon jaugé de 1 litre. Ajouter de l'eau distillée petit à petit en remuant, puis en ajouter jusqu'au trait de jauge. Prélever dix volumes de la solution ainsi obtenue et ajouter un volume d'acide chlorhydrique 17 % (15).

3. Réactifs de Hager 

Mettre 1,5 g d'acide picrique dans un ballon jaugé de 100 ml, Ajouter ensuite de l'eau distillée jusqu'au trait de jauge (15).

4. Réactifs de Bertrand

Peser 5 g d'acide silicotungstique et les dissous dans 100 ml d'acide sulfurique 6 N (15).

5. Réactifs de sonnenschein

Peser 10 g d'acide phosphomolybdique et les placer dans un ballon de 100 ml contenant une quantité d'eau fortement acidifiée avec l'acide nitrique. Porter au volume jaugé avec de l'eau distillée (15).

6. Réactifs de Wagner

Dissoudre 1,27 g d'iode et 2 g d'iodure de potassium dans 5ml d'eau distillée et porter la solution à 100 ml (15).

B. REACTIFS DES TANOÏDES

1. Réactif de Stiasny

Dissoudre 40 g de formaldéhyde dans 100 ml d'eau distillée. Ajouter un volume égal d'acide chlorhydrique 1 N pour avoir une solution de formol chlorhydrique (15).

C. REACTIFS DES STEROÏDES

1. Réactif de Lieberman-Burchard

Mélange à volume égal de la solution d'acide acétique anhydre et de l'acide sulfurique concentré (15).

D. REACTIFS DE TERPERNOIDES

1. Réactif de Hirschon

Solution d'acide trichloracétique à 20% (15).

E. REACTIF DES HETEROSIDES CYONOGENETIQUES

Plonger quelques papiers filtres bien découpés dans un mélange à volume égal d'acide picrique 0,001N et de soude caustique 0,001N pendant quelques minutes. Sécher ensuite à l'étuve à la température de 50°C pendant dix minutes. Découper le papier filtre en bandelettes (15).

F. REACTIF DES FLAVONOIDES

Préparer une solution d'alcool éthylique 97%, une solution d'acide chlorhydrique, alcool isoamylique et les copeaux de magnésium (15).

G. REACTIF DES QUINONES

Préparer une solution de soude caustique ou de la soude potassique à 1% (15).

H. REACTIF DES SAPONINES

Préparer un mélange à volume égal d'acide sulfurique 1N et de dichromate de potassium 10% (15).

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