Evaluation bactériologique des eaux de consommation des populations de Ngoa-Ekélé à Yaoundé

IV. METHODES DIAGNOSTIQUES POUR L'ANALYSE BACTERIOLOGIQUE DE L'EAU

L'analyse bactériologique proprement dite se pratique selon deux types de méthodes : les méthodes de dénombrement direct par comptage de colonies isolées après ensemencement sur ou dans un support nutritif solide et les méthodes de dénombrement indirect, par calcul statistique après répartition de l'inoculum dans un milieu de culture liquide. Quel que soit le type de méthodes employé, le résultat de la numération n'est toujours qu'une approximation du nombre réel de germes présents dans l'échantillon analysé. De nombreuses causes d'erreur peuvent en effet influer sur le résultat, par exemple l'homogénéisation, la réalisation des suspensions mères et des dilutions, la qualification du manipulateur. De plus, la précision des techniques bactériologiques est faible : elles donnent une valeur qui se range à l'intérieur d'un intervalle de confiance plus ou moins large. Pour pallier cette incertitude et pour tenir compte de la sensibilité variable du consommateur, les normes bactériologiques imposées sont telles que la limite de sécurité n'est pas dépassée même si le nombre de germes trouvé est sous-estime par rapport à la valeur réelle. (Méthodes usuelles d'analyse bacteriologique pour le contrôle sanitaire courant des eaux de mer et des coquillages, s. d.)

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1. METHODES DE DENOMBREMENT DIRECT

Ces méthodes ne sont pas applicables aux coquillages. Elles sont parfois utilisées pour les eaux de mer. L'ensemencement a lieu sur un milieu gélose sélective, soit directement, soit après filtration d'un certain volume 4 d'eau sur une membrane et dépôt de celle-ci sur le milieu solide. Les bactéries donnent naissance dans des conditions favorables à des colonies typiques isolées les unes des autres, différentes suivant les espèces, et qui peuvent être comptées. Connaissant le volume d'eau ensemencé ou filtré, le résultat final du dénombrement peut être exprimé en fonction d'un volume pris comme unité : par exemple n colonies pour 100 ml d'eau.

2. METHIODES DE DENOMBREMENT INDIRECT

L'inoculum est réparti dans un certain nombre de tubes contenant un milieu de culture liquide. La présence de la bactérie ou du groupe de bactéries recherchées se manifeste par une réaction caractéristique. Un tube est considéré comme étant positif lorsqu'il est le siège de cette réaction caractéristique. On postule alors qu'il contenait à l'origine au moins un germe recherché. Une évaluation quantitative n'est possible qu'en jouant sur les volumes de la prise d'essai et en prenant comme hypothèse que les germes sont repartis de façon homogène dans l'inoculum : si l'ensemencement porte par exemple sur 10,1 et 0,1 ml d'inoculum dans trois tubes de milieu liquide, et si le germe recherche est présent seulement dans le premier de ces tubes, il y a au moins un germe dans 10 ml d'inoculum, mais il n'y en a pas dans 1 ou 0,1 ml. Si l'unité de volume d'expression du résultat est de 100 ml, il s'ensuit que le nombre de germes est compris entre 10 et 100 dans 100 ml d'inoculum. Afin d'affiner le dénombrement, plusieurs tubes par serie sont ensemencés avec le même inoculum. Pour couvrir une gamme assez étendue de numérations, susceptibles de convenir à la plupart des besoins en hygiène conchylicole on est parfois amené à faire varier les volumes ensemencés par tube, le nombre de series et l'échelonnement des dilutions décimales. D'ordinaire on répète l'ensemencement du même inoculum dans 3~4 ou 5 tubes d'une même serie.et on utilise trois séries dans lesquels les inoculums sont respectivement de 10 ml, 1 ml et 0,1 ml.

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