4.3- Électrophorèse Capillaire (17)
C'est une technique récente qui commence à se
développer et qui offre essentiellement les avantages de la
rapidité, de la très grande résolution et, partant, de la
très grande sensibilité de la détection.
L'électrophorèse utilise un capillaire de silice de
diamètre d'environ 50 ìm et de longueur 1 m (rempli de tampon ou
de gel), et des voltages élevés (15 à 30 kV). Ceci aboutit
à des vitesses de migration très rapides des composés dans
les capillaires et ceux-ci sont détectés par absorption U.V.,
fluorimétrie ou conductimétrie directement sur le capillaire,
donc dans un volume très faible. Ceci fournit donc une
sensibilité particulièrement élevée (on injecte
seulement quelques nanolitres de l'échantillon). Les domaines
d'application sont a priori nombreux : analyse de peptides, d'acides
aminés, d'oligonucléotides ... Le nombre de plateaux est de
l'ordre de 500 000 par mètre, ce qui fournit une résolution
remarquable (on peut séparer des peptides différant d'un acide
aminé, des mélanges complexes d'oligonucléotides, des
fragments tryptiques de peptides ; la méthode est utilisée pour
tester la pureté de peptides ou d'oligonucléotides de
synthèse...). La technique peut également s'appliquer à
des molécules non ionisées en présence de micelles de
détergents appropriés.
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