- Rosmarinus
officinalis
Rosmarinus officinalis L. est une espèce de la
famille des Lamiaceae, qui est utilisée comme aromatisant alimentaire,
est aussi connue pour ses propriétés médicinales
(Oluwatuyi et al., 2004, Peng et al., 2005).
Les constituants identifiés de la composition chimique
de l'huile essentielle de Rosmarinus officinalis sont
représentés dans le tableau 9 et constituent un pourcentage de
99.67%, dont la fraction monoterpénique est la majoritaire (94.89%).
51.93% de cette fraction sont des hydrocarbures, et 41.96 % sont des
composés oxygénés. La fraction sesquiterpénique est
la plus faible avec 4.78% et constituée seulement de composés
hydrocarbonés. L'á-pinène est l'élément
majoritaire avec une teneur de 35.91%, suivi du 1,8-cinéole avec
23.64%.
Tableau 9. Composition chimique de l'HE du
Rosmarinus officinalis (chemotype à á-pinène).
Constituants
|
(%)
|
á-pinène
|
35.91
|
Camphène
|
5.73
|
Sabinène
|
4.64
|
3-octanone
|
0.73
|
â-myrcène
|
1.58
|
á-terpinène
|
0.86
|
1,8-cinéole
|
23.64
|
Cis - ocimène
|
0.44
|
ã-terpinène
|
1.37
|
Terpinolène
|
1.40
|
Linalool
|
1.67
|
Chrysanthenone
|
0.42
|
Camphre
|
5.01
|
Bornéol
|
2.69
|
á-terpineol
|
2.04
|
Verbénone
|
4.46
|
acétate de bornyle
|
2.30
|
Caryophyllene
|
3.51
|
â-humulène
|
1.27
|
- Thymus
vulgaris
Thymus vulgaris, cultivé au Maroc, donne une
huile essentielle à thymol dont le pourcentage dépasse les 40%
(Tableau 10). La fraction monoterpénique prédomine avec (97.35%)
dont 46.5% sous forme d'hydrocarbures et 50.85% sous forme de composés
oxygénés. Les hydrocarbures sesquiterpéniques ne
représentent qu'un faible pourcentage (1.7%). Les constituants de
l'huile du thym ont été identifiés avec une
totalité de 98.85%.
Tableau 10. Composition chimique de l'HE de
Thymus vulgaris.
Composé
|
(%)
|
Methyl 2-methylbutanoate
|
0.18
|
á-thujène
|
1.76
|
á-pinène
|
0.85
|
camphène
|
0.40
|
Sabinène
|
0.33
|
2-hexen-1-ol 2-ethyl
|
0.41
|
â-pinène
|
1.63
|
á-phellandrène
|
0.28
|
á-terpinène
|
3.25
|
p-cymène
|
15.59
|
ã-terpinène
|
22.25
|
p-menth-2-en-1-ol
|
0.65
|
Terpinolène
|
0.16
|
Linalol
|
1.79
|
Camphre
|
0.24
|
Bornéol
|
0.65
|
4-terpinéol
|
1.15
|
Thymol methyl ether
|
1.18
|
2-isopropyl-4-methylanisole
|
0.88
|
Thymol
|
41.39
|
Carvacrol
|
2.06
|
Isothymol
|
0.27
|
Caryophyllène
|
1.30
|
Germacrène D
|
0.40
|
II- Matériel biologique
1. Prospection des gîtes :
Tableau 11 : Gîtes larvaires
prospectés au niveau de la ville de Fès.
Nom du gîte
|
Espèce
|
Moyen de lutte
|
Date
|
Lieu
|
Grand canal
|
- Culex pipiens
- Anophèles labranchiae (faible densité)
|
Lutte Biologique
|
01/04/2010
|
Ville de Fès
|
Wed Fès
|
-
|
Lutte Biologique
|
01/04/2010
|
Ville de Fès
|
Merjet ouzani
|
-
|
Lutte Biologique
|
01/04/2010
|
Ville de Fès
|
Diamant vert
|
-
|
Lutte Biologique
|
01/04/2010
|
Ville de Fès
|
Ain chkef
|
Culex pipiens
|
Lutte Biologique
|
01/04/2010
|
Ville de Fès
|
Les espèces rencontrées au cours de nos
prospections sont :
- Culex pipiens ;
- Culex déserticula ;
- Anophèles labranchiae;
- Anophèles coustani.
Nous avons choisi de travailler sur le Culex pipiens
et l'Anophèles labranchiae.
2. Gîtes
étudiés :
Nous n'avons pas pu travailler sur des gîtes à
caractère permanent du faite que l'ensemble de ces gîtes sont
ensemencés par la Gambusia, poisson larvivore utilisé en
abondance dans les gîtes de Fès pour lutter contre les larves de
moustiques.
Nous nos sommes alors contenter de travailler sur des
gîtes temporaire à culex.
Les gîtes qui ont fait l'objet de ce travail
sont :
- Gîte à culex (Ibn Al
Baytar) :
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para37.png)
Figure 19 : Gîte Ibn Al Baytar
Ce gîte est situé au centre de l'hôpital Inb
Al Baytar à Dhar Al Mehraz.
- Gîte à anophèle (Gîte fac
chariaa) :
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para38.png)
Figure 20 : Gîte Charia
Fès-Sais
Ce gîte est situé à 500 mètre de la
Faculté Charia Fès-Sais.
IV- Tests de toxicité
ï Expérimentation 1:
Détermination de l'effet larvicide de 6 extraits
aqueux.
Répétition 1 :
Tableau 12. Mortalité (%) des larves de
Culex pipiens en fonction de la concentration des extraits aqueux (%)
de 6 espèces végétales après 24 heures
d'exposition
Espèce végétale
|
Doses testées %
|
Conditions de T° et H.R
|
%Mortalité après 24h
|
Dose %
|
Concentration
%
|
T °c
|
H.R %
|
%Mortalité Témoin
|
%Mortalité
|
Artemisia absinthium L.
|
10
|
5
|
30,4
|
25
|
0
|
0
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
0
|
9
|
0
|
Mentha piperita L.
|
10
|
5
|
30,4
|
25
|
0
|
3,7
|
6
|
4
|
7
|
0
|
8
|
0
|
9
|
11,54
|
Mentha pulegium L.
|
10
|
5
|
23,6
|
40
|
3,57
|
741
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
6,66
|
9
|
3,57
|
Nerium oleander L.
|
10
|
5
|
30,4
|
25
|
0
|
0
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
10,71
|
9
|
12,5
|
Rosmarinus officinalis L.
|
10
|
5
|
23,6
|
40
|
0
|
0
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
5,55
|
9
|
5,55
|
Myrtus communis L.
|
10
|
5
|
30,4
|
25
|
0
|
0
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
0
|
9
|
3,57
|
Répétition 2 :
Tableau 13. Mortalité (%) des larves de
Culex pipiens en fonction de la concentration des extraits aqueux (%)
de 6 espèces végétales après 24 heures
d'exposition.
Espèce végétale
|
Doses testées %
|
Conditions de T° et H.R
|
%Mortalité après 24h
|
Dose %
|
Concentration
%
|
T °c
|
H.R %
|
%Mortalité Témoin
|
%Mortalité
|
Artemisia absinthium L.
|
10
|
5
|
29,2
|
30
|
0
|
0
|
6
|
6,89
|
7
|
0
|
8
|
0
|
9
|
6,89
|
Mentha piperita L.
|
10
|
5
|
29,2
|
30
|
0
|
11,11
|
6
|
6,66
|
7
|
16
|
8
|
12,5
|
9
|
15,38
|
Mentha pulegium L.
|
10
|
5
|
29,2
|
30
|
0
|
0
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
0
|
9
|
8
|
Nerium oleander L.
|
10
|
5
|
29,2
|
30
|
0
|
0
|
6
|
2
|
7
|
26,92
|
8
|
21,74
|
9
|
44,44
|
Rosmarinus officinalis L.
|
10
|
5
|
29,2
|
30
|
0
|
8,33
|
6
|
8,33
|
7
|
16,66
|
8
|
12
|
9
|
28,57
|
Myrtus communis L.
|
10
|
5
|
29,2
|
30
|
0
|
0
|
6
|
0
|
7
|
0
|
8
|
0
|
9
|
0
|
Tableau 14. Moyenne de Mortalité (%)
des larves de Culex pipiens de 2 répétitions en
fonction de la concentration des extraits aqueux (%) de 6 espèces
végétales après 24 heures d'exposition.
Espèce végétale
|
5%
|
6%
|
7%
|
8%
|
9%
|
Témoin
|
Artemisia absinthium L.
|
0
|
3,44
|
0
|
0
|
3,44
|
0
|
Mentha piperita L.
|
7,40
|
5,33
|
8
|
6,25
|
13,46
|
0
|
Mentha pulegium L.
|
3,70
|
0
|
0
|
3,33
|
5,78
|
1,78
|
Nerium oleander L.
|
0
|
1
|
13,46
|
16,22
|
28,47
|
0
|
Rosmarinus officinalis L.
|
4,16
|
4,16
|
8,33
|
8,77
|
17,06
|
0
|
Myrtus communis L.
|
0
|
0
|
0
|
0
|
1,78
|
0
|
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para39.png)
Figure 21. Pourcentages de mortalité
suivant les extraits aqueux des 6 espèces végétales
testés.
- Variation du taux de mortalité
Après avoir exposé des larves du stade 3 et 4 de
l'espèce Cx. pipiens aux différentes concentrations des
six extraits aqueux pendant 24 h, le taux de mortalité varie selon les
concentrations (Tableau 12,13 et 14). Pour tous les extraits la
mortalité des larves atteint des taux inferieur à 50%.
De l'ensemble de ces résultats un premier classement de
l'efficacité toxique des extraits testés est mis en
évidence (figure 21), ainsi les extraits les plus toxiques sont ceux des
feuilles du Nerium oleander, du Rosmarinus officinalis et
du Mentha piperita et le moins toxique celui des feuilles du
Myrtus communis.
- Concentrations létales CL50
et CL95
Les testes ont montrés que parmi les 6 extraits
testés, aucun ne s'est révélé intéressant en
terme de toxicité. Ces résultats, bien qu'ils soient
préliminaires, illustrent bien l'intérêt que
présentent les extraits aqueux des plantes dans la lutte anti-larvaire.
ï Expérimentation 2:
Détermination de l'effet larvicide de 6 huiles
essentielles.
Tableau 15. Mortalité (%) des
larves de Culex pipiens en fonction de la concentration des huiles
essentielles (%) de 6 espèces végétales après 24
heures d'exposition.
Espèce végétale
|
Doses testées %
|
Conditions de T° et H.R
|
%Mortalité après 24h
|
Dose %
|
Concentration
%
|
T °c
|
H.R %
|
%Mortalité Témoin
|
%Mortalité
|
Rosmarinus officinalis L.
|
2
|
0,4
|
21,9
|
42
|
7,14
|
100
|
0,6
|
100
|
0,8
|
100
|
1
|
100
|
0,1
|
0,05
|
24,1
|
41
|
9,52
|
3,29
|
0,06
|
3,89
|
0,07
|
11,58
|
0,08
|
47,37
|
0,09
|
47,14
|
0,5
|
0,1
|
26,7
|
32
|
13,33
|
69,23
|
0,2
|
96 ,14
|
0,3
|
96,14
|
0,4
|
100
|
0,5
|
96,14
|
Eucalyptus camaldulensis L.
|
2
|
0,4
|
21,9
|
42
|
3,45
|
100
|
0,6
|
100
|
0,8
|
100
|
1
|
100
|
0,1
|
0,05
|
24,1
|
41
|
13,63
|
27,63
|
0,06
|
62,7
|
0,07
|
20,78
|
0,08
|
93,89
|
0,09
|
65,69
|
0,5
|
0,1
|
31,5
|
28
|
4,16
|
8,33
|
0,2
|
9,52
|
0,3
|
3,84
|
0,4
|
7,41
|
0,5
|
20,83
|
Salvia officinalis L.
|
0,1
|
0,05
|
21,1
|
41
|
13,63
|
10,53
|
0,06
|
14,41
|
0,07
|
65,69
|
0,08
|
73,27
|
0,09
|
96,13
|
0,5
|
0,1
|
31,5
|
28
|
4
|
8
|
0,2
|
5
|
0,3
|
81,82
|
0,4
|
82,76
|
0,5
|
96,43
|
Tableau 15. Mortalité (%) des larves de
Culex pipiens en fonction de la concentration des huiles essentielles
(%) de 6 espèces végétales après 24 heures
d'exposition (suite).
Espèce végétale
|
Doses testées %
|
Conditions de T° et H.R
|
%Mortalité après 24h
|
Dose %
|
Concentration
%
|
T °c
|
H.R %
|
%Mortalité Témoin
|
%Mortalité
|
Thymus vulgaris L.
|
2
|
0,4
|
21,9
|
42
|
7,14
|
100
|
0,6
|
100
|
0,8
|
100
|
1
|
100
|
0,5
|
0,1
|
26,7
|
32
|
10
|
96,16
|
0,2
|
92,33
|
0,3
|
96,28
|
0,4
|
100
|
0,5
|
100
|
Artemisia absinthium L.
|
2
|
0,4
|
23,3
|
33
|
8,51
|
51,20
|
0,6
|
77,73
|
0,8
|
67,61
|
1
|
81,47
|
0,5
|
0,1
|
26,7
|
32
|
13,33
|
8,47
|
0,2
|
38,45
|
0,3
|
68,16
|
0,4
|
76,92
|
0,5
|
73,07
|
Origanum majorana L.
|
0,5
|
0,1
|
31,5
|
28
|
0
|
35,29
|
0,2
|
56
|
0,3
|
83,33
|
0,4
|
96,43
|
0,5
|
100
|
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para40.png)
Figure 22. Effet larvicide des huiles
essentielles (0,1%) de Rosmarinus officinalis,
Eucalyptus camaldulensis et Salvia officinalis
sur culex pipiens.
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para41.png)
Figure 23. Effet larvicide des huiles
essentielles (0 ,5 %) de Rosmarinus officinalis,
Eucalyptus camaldulensis ,Salvia officinalis
, Thymus vulgaris ,Artemisia absinthum et Origanum majorana
sur culex pipiens .
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para42.png)
Figure 24. Effet larvicide des huiles
essentielles (2 %) de Rosmarinus officinalis,
Eucalyptus camaldulensis,Thymus vulgaris et
Artemisia absinthum sur culex pipiens .
Tableau 16. Mortalité (%) des larves
d'Anopheles labranchiae en fonction de la
concentration d'huile essentielle (%) d'Eucalyptus camaldulensis
L. après 24 heures d'exposition.
Espèce végétale
|
Doses testées %
|
Conditions de T° et H.R
|
%Mortalité après 24h
|
Dose %
|
Concentration
%
|
T °c
|
H.R %
|
%Mortalité Témoin
|
%Mortalité
|
Eucalyptus camaldulensis L.
|
0,2
|
0,15
|
24,4
|
54
|
3,45
|
3,45
|
0,17
|
6,66
|
Nous avons effectués un seul teste sur l'Anopheles
labranchiae, vecteur du paludisme au Maroc, avec seulement deux
concentration de l'huile essentielle d'Eucalyptus camaldulensis du
fait de sa présence en très faible densité dans les
gîtes étudiés.
- Variation du taux de mortalité
Les résultats des tests d'activités larvicides
réalisés sur les huiles essentielles (Figure 22, 23 et 24 et
Tableau 15) indiquent une relation directe des pourcentages de
mortalité des larves avec la concentration en huiles essentielles.
Les concentrations minimales nécessaires pour obtenir
100 % de mortalité des larves de Culex pipiens ont
été évaluées à 0,4 % pour Thymus
vulgaris, Rosmarinus officinalis et Eucalyptus camaldulensis et
à 0,5 % Origanum majorana.
Les huiles essentielles que nous avons testées sont
donc toutes larvicides, avec un effet concentration-dependant.
Tableau 17. Concentrations létales CL50
et CL95 (24 h) des huiles essentielles de 6 espèces
végétales à l'égard des larves de Culex
pipiens.
Espèce végétale
|
CL50
|
CL95
|
Rosmarinus officinalis
|
0,095
|
0,195
|
Eucalyptus camaldulensis
|
0,39
|
0,595
|
Salvia officinalis
|
0,065
|
0,49
|
Thymus vulgaris
|
-
|
0,25
|
Artemisia absinthium
|
0,24
|
-
|
Origanum majorana
|
0,17
|
0,37
|
- Concentrations létales CL50
et CL95
L'effet toxique des extraits analysés est clairement
mis en évidence avec les valeurs des CL50 et des CL95 : les huiles
essentielles de Salvia officinalis, Rosmarinus officinalis
et Origanum majorana demeurent les plus efficaces, avec des valeurs
respectives de 0,065 % et 0,49 %, 0,095 % et 0,195 %, 0,17 % et 0,37 %.
Ces résultats, se sont révélés
intéressants en terme de toxicité, ils illustrent
l'intérêt que présentent les huiles essentielles dans la
lutte anti-larvaire.
ï Expérimentation 3: Comparaison
entre l'action des extraits de plantes et celle des insecticides sur les larves
de moustiques.
Tableau 18. Mortalité (%) des larves
de culex pipiens en fonction de la concentration
d'insecticides (mg/l) du Téméphos et Malathion après 24
heures d'exposition.
Insecticide
|
Doses testées (mg/l)
|
Conditions de T° et H.R
|
%Mortalité après 24h
|
Dose (mg/l)
|
Concentration
(mg/l)
|
T °c
|
H R %
|
%Mortalité Témoin
|
%Mortalité
|
Téméphos
|
1,25
|
0,00125
|
23,6
|
40
|
0
|
80,77
|
0,0025
|
100
|
0,005
|
100
|
0,0125
|
100
|
6,25
|
0,025
|
100
|
Malathion
|
1,25
|
0,00125
|
23,6
|
40
|
0
|
5
|
0,0025
|
3,84
|
0,005
|
3,70
|
0,0125
|
36
|
6,25
|
0,025
|
65,38
|
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para43.png)
Figure 25. Effet larvicide du
Téméphos et du Malathion sur les larves de
culex pipiens après 24 heures d'exposition.
- Variation du taux de mortalité
Les résultats obtenus (Tableau 18) montrent que les
larves de Culex pipiens sont plus sensibles au Téméphos
qu'au Malathion. À partir de la concentration 0,0025 mg/l en
Téméphos nous avons obtenu 100 % de mortalité.
Tableau 19. Concentrations létales CL50
et CL95 (24 h) des insecticides à l'égard des larves de
Culex pipiens.
Insecticides
|
Dose (mg/l)
|
CL50
|
CL90
|
CL95
|
Taux de résistance*
|
Téméphos
|
1,25
|
-
|
0,00188
|
0,00219
|
0,82
|
Malathion
|
6,25
|
0,0185
|
-
|
-
|
-
|
* c'est le rapport entre la CL90 de la souche
testée/CL90 S-Lab (0,0023 mg/l)
- Concentrations létales CL50 et
CL95
L'effet toxique des deux insecticides testés est
clairement mis en évidence avec les valeurs des CL50 et des CL95 : le
Téméphos demeure le plus efficace avec une valeur de CL95 :
0,00219 mg/l et avec un taux de résistance de 0,82.
Tableau 20. Conditions de température
et d'humidité Relative durant la réalisation des tests.
Jours
|
Dates
|
Température °c
|
Humidité Relative %
|
J1
|
06/05/10
|
23,3
|
33
|
J2
|
14/05/10
|
21,9
|
42
|
J3
|
18/05/10
|
23,6
|
40
|
J4
|
20/05/10
|
30,4
|
25
|
J5
|
24/05/10
|
24 ,4
|
54
|
J6
|
26/05/10
|
24,1
|
41
|
J7
|
31/05/10
|
26,7
|
32
|
J8
|
01/06/10
|
31,5
|
28
|
J8
|
03/06/10
|
29,2
|
30
|
![](Activites-larvicides-des-extraits-de-plantes-sur-les-larves-de-moustiques-vecteurs-de-maladies-para44.png)
Figure 26. Conditions de température et
d'humidité relative.
Les valeurs représentées dans le tableau 20 et
figure 26 montre les variations de température et d'humidité
relative notés au cours des testes, ces deux paramètres
peuvent avoir un effet sur les larves et par conséquence sur le taux de
mortalité.
La température idéale pour la réalisation
des tests doit être de 25 à 27°c et l'humidité
relative doit être de 70 à 80 %.
DISCUSSION :
Au début de nous testes nous avons travaille avec
l'eau distillée à la place de l'eau du gîte, or les
résultats des testes était invalides. Cela peut être
expliqué par le fait que les larves on besoin l'eau dans laquelle elles
trouvent leur nourriture c'est à dire riche en particule organique.
L'eau distillée est une eau qui a subie une distillation et qui est
théoriquement ainsi exempte des minéraux et organismes que l'on
pourrait retrouver dans l'eau « naturelle ».
Les résultats obtenus en travaillant avec de l'eau du
gîte sont valides.
Parmi les testes effectues, les résultats obtenus par
les huiles essentielles montrent que celle-ci possèdent un effet
larvicide intéressant sur des larves au stade 3 et 4 et
particulièrement les huiles essentielles de Salvia
officinalis, Rosmarinus officinalis et Origanum majorana
qui demeurent les plus efficaces, avec des valeurs de CL50 et CL95 respectives
de 0,065 % et 0,49 %, 0,095 % et 0,195 %, 0,17 % et 0,37 %.
Les résultats obtenus par les extraits aqueux des
poudres végétales, ont montré qu'aucun des 6 extraits
testés ne s'est révélé intéressant en terme
de toxicité, malgré cela ces résultats illustrent bien
l'intérêt que présentent les extraits aqueux des poudres
végétales dans la lutte anti-larvaire. L'extrait de Nerium
oleander et celui de Rosmarinus officinalis présentent les
taux de mortalités les plus importants par rapport au autres extraits
avec des valeurs respectives de 28,47 % et 17,06 %.
Par ailleurs, la toxicité de l'extrait de Nerium
oleander a été étudiée sur des larves au
stade 4 de Culex pipiens dans les travaux de Aouinty et al. (2006)
les essais ont démontré une activité insecticide avec
une CL50 de 3130 mg/l.
Pour les insecticides le Téméphos reste le plus
important en terme de toxicité avec une CL95 de 0,00219 mg/l.
Les conditions de température et d'humidité
relative peuvent avoir un effet sur les résultats obtenus, ainsi que
l'émergence des larves du stade 4 en nymphes.
L'ensemble de ces résultats montre que les insecticides
utilisés dans la lutte antilarvaire se sont révélés
très efficaces contre Culex pipiens par rapport aux extraits
aqueux et aux huiles essentielles.
Néanmoins, les huiles essentielles en particuliers
celles de Salvia officinalis, Rosmarinus officinalis et
Origanum majorana, ont présentés une activité
importante vis à vis des larves.
Nous ne pouvons pas conclure quant à l'action de
l'huile essentielle de l'Eucalyptus camaldulensis sur
l'Anophèle labranchiae du faite de la faible densité
utilisé dans le test.
|
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