II.2. Méthodes
II.2.1. Screening
Phytochimique
II.2.1.1. Principe
Le screening Phytochimique est un test qualificatif qui permet
de mettre en évidence les composés chimiques se trouvant dans un
produit végétal ou autres, tel que :
- Les alcaloïdes ;
- Les saponines ;
- Les poly phénols ;
- Les flavonoïdes ;
- Les quinones ;
La présence de ces derniers est attestée par la
formation d'un précipité, le changement de coloration du
milieu...
Pour y parvenir, nous utilisons la technique des
réactions en solution qui utilise les réactifs
spécifiques :
Mode
opératoire
- Poser 80g de poudre, le mettre dans un ballon à fond
plat ;
- Ajouter 800ml d'eau distillée ;
- Décocter pendant 5 minutes puis
filtré ;
- Au filtrant, ajouter 5ml d'extrait dans chaque tube.
II.2.1.2. Recherche des
différents groupes chimiques
a) Recherche des alcaloïdes
· Mettre 5ml d'extrait aqueux acidulé dans un tube
à essai ;
· Ajouter 1ml d'acide de réactif de
DRAGENDORF ;
· Le test positif, se lit sur la formation d'un
précipité rouge-orange.
b) Recherche des saponines
· Introduire 5ml d'extrait aqueux acidulé dans un
tube à essai ;
· Ramener le volume total à 10ml au moyen d'eau
distillée
· Agiter la solution fortement pendant 15 secondes, le
tube bouché avec le pouce ;
· Observer la formation persistante d'une mousse d'au
moins 1 cm de hauteur, mesurer à l'aide d'une latte pendant 15 minutes,
le test est positif.
c) Recherche des poly phénols
· Prélever 5ml d'extrait polaire ;
· Ajouter un volume égal de Fecl3 2M, et K3Fe
(CN)6 réactif de Burton ;
· Test positif, apparition d'une coloration bleu
violacée.
d) Recherche des flavonoïdes
A 5ml d'extrait aqueux, on additionne 3ml de réactif
de SHINODA et quelques fragments de magnésium. On y ajoute ensuite 1ml
d'alcool iso-amylis, l'apparition d'une coloration orange, rassemblée
dans la couche surnageant d'alcool iso amylique, indique que la présence
de flavonoïdes.
e) Recherche des quinones
A l'extrait organique, on ajoute 2ml d'hydroxyde de sodium
10M, puis agité énergiquement l'apparition rapide ou lente d'une
coloration rouge orange indique la présence des quinones.
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