ANNEXES
Annexe 1
UNIVERSITE CHEIKH ANTA DIOP
Faculté des Sciences et Techniques
Département de Biologie Animale
Laboratoire Écologie Vectorielle et Parasitaire
(LEVP)
FICHE DE LECTURE DES TESTS DE SENSIBILITE DES
MOUSTIQUES ADULTES
Enquêteur.
Nom & adresse de l'Institut .
Pays . Région . District . Localité/Village .
Espèces testées. Age (jours) . Etat physiologique
.
Insecticide testé : Concentration .
Date d'imprégnation . Date d'expiration .
Date de sortie du papier de l'emballage . Nombre d'utilisations
antérieures .
Date du test. Temps d'exposition (minutes)
Conditions du test
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Température
de à
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Humidité Relative
de à
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Période d'exposition
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Période d'observation
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Résultats du Test
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Lot 1
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Lot 2
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Lot 3
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Lot 4
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Total des
moustiques
testés
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Nombre de moustiques du lot témoin
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Nombre de moustiques testés
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Nombre de moustiques abattus (KD) après une exposition
de : *:
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10'
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15'
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20'
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30'
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40'
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50'
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60'
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80'
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Nombre de moustiques morts à la fin de la période
d'observation
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Mortalité observée (%)
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b
Mortalité corrigée (%)
Espèce des survivants **
Mécanisme(s) de résistance **
C
* pour le DDT et les pyréthrinoïdes seulement **=
là où c'est possible
Annexe 2
UNIVERSITE CHEIKH ANTA DIOP
Faculté des Sciences et Techniques
Département de Biologie Animale
Laboratoire Écologie Vectorielle et Parasitaire
(LEVP)
Protocole d'extraction d'ADN au CTAB 2%, à partir
de moustiques (sans protéinase K)
1. Objectifs
- Standardiser la méthode
- Avoir des ADN de qualité pour une bonne PCR.
2. Champ d'application UMR 198 URMITE,
pôle MIE
3. Mode opératoire
- Broyer chaque échantillon (moustique entier ou pattes ou
ailes, etc.) dans 200ul de CTAB à 2%,
- Mettre au Bain-Marie 56°c pour une durée d'une
à 24 heures
- Ajouter 200ul de chloroforme
- Mélanger par inversion,
- Centrifuger 5 minutes à 12000trs/mn,
- Prélever la phase supérieure et la mettre dans un
autre tube,
- Ajouter 200ul d'isopropanol dans le surnageant
- Bien mélanger par inversion,
- Centrifuger 15 minutes à 12000trs/mn,
- Vider l'isopropanol, bien égoutter et ajouter 200ul
d'éthanol 70%,
- Centrifuger à 5 minutes à 12000trs/mn,
- Vider l'éthanol,
- Sécher le culot 5 minutes maximum au Speed-Vac,
- Reprendre le culot dans 200ul de tampon d'élution,
- Laisser sur le paillage pendant toute la nuit ou pendant une
demi-journée
- stocker l'extrait d'ADN à T -20°C
d
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