Importance de l'hémoglobine et de l'hématocrite dans le diagnostic des anémies à la clinique d'Akpakpa

REPUBLIQUE DU BENIN

*-*-*-*-*-*-*

MINISTERE DE L'ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE

*-*-*-*-*-*-*

UNIVERSITE D'ABOMEY-CALAVI

*-*-*-*-*-*-*

ECOLE POLYTECHNIQUE D'ABOMEY-CALAVI

*-*-*-*-*-*-*

DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE

*-*-*-*-*-*-*

Option : Analyses BioMédicales

PO1)R L'OBTENTION D1) DIPLOWE DE LICENCE
PROTESSIONNELLE

Importance

de l'hémoglobine et de

l'hématocrite dans

le diagnostic des

anémies à

la clinique d'Akpakpa.

Réalisé et présenté par :

Tagnon Michel Naraiche
PATINVOH

Sous la direction de :

TUTEUR:

SUPER~ISEUR:

JURY

Mr. Mohamed BADAROU Technicien Supérieur en Analyses Biomédicales

PRESIDENT DU JURY Pr Frederic S. LOKO

MEMBRES DU JURY

Dr Safiou YESSOUFOU
Dr Adolphe TOPANOU

Dr Adolphe TOPANOU Pharmacien Biologiste et Industriel Professeur Assistant d'Hématologie et de Pharmacologie à l'EPAC/UAC

Année académique: 2009-2010
3ème promotion

3ème Promotion
REPUBLIQUE DU BENIN
=*=*=*=*=*=
MINISTERE DE L'ENSEIGNEMENT SUPERIEUR
ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
=* =* =*=*=*=*=*
UNIVERSITE D'ABOMEY-CALAVI
=* =*=*=*=*=*=*
ECOLE POLYTECHNIQUE D'ABOMEY-CALAVI
=* =*=*=*=*=*=*
DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE

DIRECTEUR :
Professeur Félicien AVLESSI

DIRECTEUR ADJOINT ET
CHEF SERVICE DES ETUDES ET DE LA PEDAGOGIE:
Docteur Clément BONOU

CHEF DE DEPARTEMENT :
Docteur Julien SEGBO

DEDICACES

iv

Je dédie ce travail

Au Père de Toutes miséricordes

Merci à toi pour ton amour et ta fidélité sans faille de tous les jours. « Il nous affermira aussi jusqu'à la fin 1Co.1:8 »

A toi honneur, gloire et puissance éternellement.

A ma chère Boss Cécile GOUMMABOU PATINVOH et à mon cher Boss Cyr Maur A. PATINVOH

Pour votre amour et tous les sacrifices consentis pour assurer mon éducation et ma formation. Puisse ce travail satisfaire toute votre confiance et couronné vos efforts.

A mes chers frères et soeurs: Narcisse, Marie-Abel Marie-Enock; Mélusine et Brigitte.

Que ce travail qui est le vôtre soit notre fierté à tous. Recevez ici l'expression de toute mon affection.

A mes tantes Amédée, Firmence, Rachel, mes oncles Eusèbe, Elie Moise, Aurel et mes grands parents

Pour tout le soutien et les encouragements. Mes sincères remerciements.

A Mrs Jean-Robert, Brice, Arnaud et Mmes Roseline et Merveille

Pour toute votre contribution que vous n'avez pas marchander lors de la réalisation de ce travail. Recevez ici ma totale reconnaissance.

A mes collègues de la 3^ème promotion de Licence Professionnelle

En souvenir des trois années qui, j'en suis sûr, rappelleront notre vie en groupe Bonne carrière à vous.

A tous ceux qui me sont chers et qui ont manifesté leur affection à mon égard lors de ma formation et de la réalisation de ce travail. Merci

REMERCIEMENTS

vi

Mes sincères remerciements à :

- A mon superviseur, Docteur Adolphe TOPANOU

Malgré vos multiples occupations, vous avez accepté sans réserve de diriger ce travail. Tout au long de ce travail j'ai admiré votre immense courtoisie, votre respect de la personne humaine et votre désir de former des cadres dynamiques.

Veuillez recevoir ici ; l'expression déférente de ma profonde reconnaissance. - A notre tuteur Monsieur Mohamed BADAROU

Malgré vos contraintes professionnelles vous nous avez beaucoup aidés et guidés dans nos recherches.

- Au Docteur Aboudou Pierre BONI

Pour avoir accepté mon stage dans votre centre.

- Au Docteur ATINKPAHOUN

Pour tout son amour

- A l'attaché de recherche en Hématologie, Monsieur Jean Robert KLOTOE Pour votre totale disponibilité

- Tout le collectif du personnel du laboratoire de la Clinique d'Akpakpa

Pour leur accueil, leur disponibilité et leur soutien.

- Aux autorités de l'EPAC, en particulier ceux du département GBH Pour avoir organisé ce stage.

- A tout le corps enseignant du département GBH

Qui n'a ménagé aucun effort pour nous assurer une formation de qualité.

- A tous ceux qui ont contribué de près ou de loin à la réalisation de ce travail

HOMMAGES

HOMMAGES A NOS JUGES

4 A notre président de jury

En acceptant de présider notre jury de soutenance de rapport de fin de formation, vous nous faites un grand honneur. Cher président de jury, par vos observations nous espérons améliorer la qualité de ce travail. Nous vous prions de croire en l'expression de nos profonds respects et de nos vives gratitudes.

4 Aux membres de jury

Nous sommes très heureux de vous voir dans notre jury. Vos critiques sont indispensables à l'amélioration de ce travail. Nos Hommages respectueux.

ix

LISTE DES ABREVIATIONS

EPAC : Ecole Polytechnique d'Abomey-Calavi

GBH : Génie de Biologie Humaine

Hb : Hémoglobine

Hte : Hématocrite

VGM : Volume Globulaire Moyen

TCMH : Teneur Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine CCMH : Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine OMS: Organisation Mondiale de la Santé

FL: Fentolitre

Pg : Picogramme

G/L : Giga par Litre

T/L : Tera par litre

GR: Globule Rouge

GB: Globule Blanc

g/dl: Gramme par décilitre

NFS: Numération Formule Sanguine

% : pourcentage = : Egale

mm³ : Millimètre cube

min : minutes QQ : quelques Vit : vitamine TBG : Test Biologique de Grossesse

LISTE DES TABLEAUX

Tableau I : Classification morphologique des anémies 11

Tableau II : Répartition des patients suivant le sexe et la tranche d'âge 23

Tableau III : Répartition des valeurs normales de l'Hémoglobine et de 38
l'Hématocrite utilisé

LISTE DES FIGURES et GRAPHIQUES

Figure 1 : 4

Schéma du diagnostic biologique et étiologique des anémies

Schéma récapitulatif de la détermination de l'Hématocrite par la Figure 2 : méthode du micro-Hématocrite 7

Graphique I : Diagnostic des anémies en fonction de l'Hémoglobine 23

Graphique II : Diagnostic des anémies en fonction de l'Hématocrite 24

xi

RESUME

L'anémie est la réduction de la concentration de l'hémoglobine dans le sang circulant. Cette réduction entraine souvent une baisse parallèle du nombre de globules rouges ainsi que de l'hématocrite. Son diagnostic peut se fait de plusieurs manières dont le diagnostic clinique fait par le médecin et le diagnostic biologique fait au laboratoire. La présente étude intitulée « importance de l'hémoglobine et l'hématocrite dans le diagnostic des anémies à la clinique d'Akpakpa » a porté sur 153 échantillons prélevés sur EDTA.

Notre objectif général pour ce travail est de vérifier si seul l'Hématocrite permet d'identifier la présence d'une anémie en cas d'urgence. Pour atteindre cet objectif nous avons réalisé la NFS sur les échantillons à l'aide de l'automate hématologique BC-2800. Ensuite nous avons diagnostiqué les cas d'anémie en nous basant d'une part sur les valeurs du taux d'hémoglobine et d'autre part sur l'hématocrite.

Les résultats obtenus ont révélé 55% de sujets anémiés en se basant sur le taux d'hémoglobine contre 32% lorsqu'on considère les valeurs de l'hématocrite. On remarque donc que 23% des sujets reconnus anémiés suivant le taux d'hémoglobine apparaissent normaux suivant l'hématocrite. Ces résultats obtenus montrent qu'on ne pourrait se servir uniquement de l'hématocrite pour faire le diagnostic de l'anémie.

Mais notons qu'avec la forte corrélation existant entre l'hémoglobine et l'hématocrite nous pouvons proposer pour le diagnostic de l'anémie que ces deux paramètres soient dosés afin que l'hématocrite serve d'indice de contrôle de l'hémoglobine pour des résultats encore plus fiables.

ABSTRACT

Anaemia is the reduction of the concentration of haemoglobin in circulating blood. This reduction entraine often a parallel fall of the number of red globules as well as haematocrit. Its diagnosis can is made several ways in which the clinical diagnosis made by the doctor and the biological diagnosis made at the laboratory. The present study entitled "importance of haemoglobin and the haematocrit in the diagnostic one of anaemias to the private clinic of Akpakpa" related to 153 samples taken on EDTA.

Our general objective for this work is to check so only haematocrit makes it possible to identify the presence of an anaemia in the event of urgency. To achieve this goal we carried out the NFS on the samples using the hematologic automat Bc-2800. Afterwards we diagnosed the cases of anaemia by basing us on the one hand on the values of the rate of haemoglobin and on the other hand on the haematocrit.

The results obtained revealed 55% of subjects weakened while being based on the rate of haemoglobin against 32% when one considers the values of the haematocrit. It is thus noticed that 23% of the recognized subjects weakened according to the rate of haemoglobin appear normal according to the haematocrit. These results obtained show that one could not be useful oneself only of the haematocrit to make the diagnosis of anaemia.

But let us note that with the strong correlation existing between haemoglobin and the haematocrit we can propose for the diagnosis of anaemia that these two parameters are proportioned so that the haematocrit serf of index of control of haemoglobin for results even more reliable.

SOMMAIRE

INTRODUCTION

PREMIERE PARTIE : GENERALITE

DEUXIEME PARTIE : CADRE, MATERIEL ET METHODE D'ETUDE

TROISIEME PARTIE : RESULTATS ET COMMENTAIRES

CONCLUSION

SUGGESTION

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUE

ANNEXES

TABLE DES MATIERES

INTRODUCTION

INTRODUCTION

1

L'hémogramme est un examen capital qui permet d'apprécier les perturbations hématologiques d'un patient. Dans la plupart des centres de santé notamment à la clinique d'Akpakpa, il fait partie du bilan de routine et est de ce fait très demandé. Dans le cadre de ce travail intitulé « Importance de l'Hémoglobine et de l'Hématocrite dans le diagnostic des anémies à la clinique d'Akpakpa », nous nous sommes intéressés à deux des techniques (hémoglobine et hématocrite) de la Numération Formule Sanguine (NFS).

En effet l'Hémoglobine et l'Hématocrite sont deux paramètres complémentaires et très importants qui permettent d'affirmer avec précision la présence ou non d'une anémie.

Des études antérieures ont montré l'existence d'une forte corrélation entre ces deux paramètres [12].

C'est à cet effet que nous avons formulé pour ce travail l'objectif général qui est de vérifier si seul l'Hématocrite permet d'identifier la présence d'une anémie en cas d'urgence.

Pour atteindre cet objectif général, nous avons adopté le plan suivant :

- dans la première partie, nous présenterons les généralités

- dans la deuxième partie, nous décrirons notre lieu de stage et exposerons notre méthode de travail.

- dans la troisième partie, nous présenterons nos résultats et commentaires. Enfin la quatrième partie sera consacrée à la conclusion et aux suggestions.

PREMIERE PARTIE :

GENERALITES

I -GENERALITES

I-1- ANEMIE

I-1-1- Definitions

L'organisation mondiale de la santé définit l'anémie par un taux d'hémoglobine inférieur à une valeur normale qui varie en fonction de l'âge et du sexe de la personne [10].

Selon BERNARD J., LEVY J-P., et al, l'anémie est la dilution du taux d'hémoglobine avec ou sans diminution du nombre de Globules rouges dans le sang [7].

Pour L. Mauvieux, une anémie est définie par la baisse du taux de l'hémoglobine du sang circulant par rapport à des valeurs normales obtenues à partir d'un échantillon le plus large possible de sujets sains et en tenant compte du sexe et de l'âge (se reporter aux valeurs normales de l'hémogramme). Parallèlement à cette baisse, on observe le plus souvent un abaissement du nombre de globules rouges ainsi que de l'hématocrite [1].

E. Le Gall., définit l'anémie par une diminution de la masse des globules rouges ou de la concentration de l'hémoglobine circulante par rapport aux valeurs correspondant à l'âge du patient. Ainsi, l'anémie peut être découverte soit à l'occasion d'une numération systématique, soit en raison de symptômes liés à l'anémie : pâleur de la peau et des muqueuses, asthénie, polypnée, tachycardie, céphalées, vertiges, bourdonnements d'oreilles, souffle systolique anorganique, troubles de la conscience [2].

De toutes ces différentes définitions nous pouvons retenir que l'anémie est la réduction de la concentration de l'hémoglobine dans le sang circulant. Cette réduction entraine souvent une baisse parallèle du nombre de globules rouges ainsi que de l'hématocrite.

I-1-2- Diagnostic de l'anémie

Le diagnostic de l'anémie se fait suivant plusieurs méthodes dont on peut citer entre autre : - Le diagnostic biologique qui repose sur les examens réalisés au laboratoire

~~~~~~~~~~ ~~~~~~~~~~ ~~~~~~~~ ~~~~~ ~~~~~~~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~~~~ ~~ ~~~~~~~ ~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~~ ~~ ~~~~~~~ ~~~ ~~~~~~~~~~~ ~~~~~~~~~~ ~~~~~~~~~~~~~ ~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~~ ~~ ~~~~~~~ !~ ~~ " ~~~~~ ~~~ ~~~#~~~~ ~~~~~~~~ ~~~~ ~~~~~~ ~~~~~~~~~ ~~~~~~~~~ ~~~~~~~ ~~~~~ ~~ ~~ ~~~~~~~~~~

4

[2]

FIGURE I : Schéma du diagnostic biologique et étiologique des anémies

- Le diagnostic clinique repose sur les observations du clinicien : Ici on note

Certains signes qui sont plus spécifiques à une forme d'anémie :

· Pâleur avec ictère : anémie hémolytique, anémie secondaire à une hépatopathie ;

· Koïlonychie : anémie ferriprive ;

· Glossite : déficit de vit B12 ;

· Stomatite angulaire : anémie ferriprive ;

Splénomégalie : hémolyse, syndrome myélo- ou lymphoprolifératif

· Neuropathie, démence : déficit en vit. B₁₂ ou acide folique ;

· Douleur osseuse : anémie falciforme [6].

D'autres symptômes cliniques qui sont :

- ceux du syndrome d'anémie chronique ;

- ceux en rapport avec la cause du saignement (signes d'ulcère gastrique, par exemple) ;

- ceux en rapport avec l'hyposidérémie prolongée :

. Peau sèche et rugueuse ;

. Alopécie diffuse modérée ;

. Koïlonychie : ongles fendillés, fragiles, concaves ;

. Glossite : langue rouge, dépapillée, sensible aux mets acides ; . Parfois dysphagie ;

- l'asthénie résulte à la fois de l'anémie et du déficit en fer [3].

- Anémie d'installation rapide :

- pâleur ;

- dyspnée ;

- amplification du rythme respiratoire (polypnée permanente) ;

- tachycardie ;

- palpitations, parfois angine de poitrine ;

- fatigue ;

- étourdissements, vertiges, malaises, céphalées ;

- oedèmes ;

- si installation très rapide (QQ jours, QQ semaines : risques d'état de choc (Collapsus) [5].

I-2- DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE

I-2-1- Description des paramètres biologiques de l'anémie

Comme indicateurs biologiques de l'anémie, nous pouvons citer :

6

Importance de l'hémoglobine et de l'hématocrite dans le diagnostic des anémies à la clinique d'Akpakpa. I-2-1-1- Les Hématies

Les hématies sont des cellules du sang de 7 à 8 micromètres de diamètre. Elles se présentent sous forme d'une lentille creuse des deux cotés (biconcave). Elles sont dépourvues de noyaux et issues des érythroblastes médullaires. Son rôle le plus important est d'assurer le transport de l'oxygène des poumons aux tissus [11].

I-2-1-2- L'Hémoglobine

L'hémoglobine est une protéine de poids moléculaire 69.000 daltons, pigment respiratoire contenu dans les hématies ; majeur constituant du Globule Rouge, elle est une chromoprotéine dont la principale fonction est le transport respiratoire [8]. Elle assure le transport de l'oxygène des poumons plus précisément au niveau des alvéoles pulmonaires vers les tissus et du gaz carbonique des tissus vers les poumons. Elle est constituée de l'hème et de globine. La globine est constituée de l'association de quatre chaines d'acides aminés et l'hème est constitué d'une molécule de porphyrine et d'un atome de fer qui est à l'état ferreux ce qui permet la fixation de l'oxygène.

Les substances nécessaires à la formation de l'hémoglobine sont :

· Le fer ;

· Le cuivre ;

· La vitamine B 12 ;

· La pyridoxine (appelée également vitamine B6) ;

· La vitamine C ;

· L'acide folique ;

· Des protéines.

Plusieurs techniques permettent de doser l'hémoglobine. En effet dans les laboratoires équipés, l'hémoglobine est dosée par la méthode colorimétrique à la cyanméthémoglobine nécessitant l'utilisation de spectrophotomètre ou d'hémoglobinomètre. Par contre, dans les laboratoires peu équipés ne disposant pas de spectrophotomètre ni d'hémoglobinomètre, on a recours aux méthodes classiques tels que la méthode de tallquist [10].

7

I-2-1-3-L'Hématocrite

L'hématocrite est la proportion de Globule Rouges par rapport au volume total du sang. Elle permet de rechercher une hémoconcentration ou une anémie. La mesure de l'hématocrite

ma. On lui

permet d'apprécier la proportion de Globule Rouges par rapport à celle du plas

: la méthode du Macro-

reconnait deux méthodes de mesure Hématocrite et celle du micro-

hématocrite [10 ]. Celle la plus utilisée est la méthode du micro-

hématocrite. L'un des avantages de cette méthode est sa simplicité technique, en particulier lorsqu'elle s'applique aux petits échantillons de sang obtenu par ponction cutanée [10

]. En moyenne, les valeurs de l'hématocrite équivalent à peu près à trois fois le taux de l'hémoglobine [13].

Composition en volume du sang : PCV : Proportion Cellulaire par

(de haut en bas) plasma, leucocytes , rapport au Volume sanguin

thrombocytes, et érythrocytes

FIGURE II

: Schéma récapitulatif de la détermination de l'Hématocrite par la méthode du micro-Hématocrite [11]

I-2-2- Description des constantes érythrocytaires

I-2-2-1- Le Volume Globulaire Moyen

Le Volume Globulaire Moyen ou VGM est un paramètre biologique rendant compte de la taille des Globules Rouges. Il représente le volume qu'un érythrocyte moyen occupe dans le sang. Il se mesure lors d'une prise de sang sur l'hémogramme ou la numération formule sanguine [9].

La valeur du VGM permet souvent de poser le diagnostic biologique de l'anémie. Il se calcul à l'aide de la formule suivante :

Hte Hte en %

VGM= x 10⁷ VGM en fL ou u3

NGR NGR en T/L

- Lorsque la VGM est inférieur à la valeur normale, on parle de microcytose

- Lorsque la VGM est compris entre les valeurs normales, on parle de normocytose - Lorsque la VGM est supérieur à la valeur normale, on parle de macrocytose

I-2-2-2- La teneur Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine

La teneur Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine est un paramètre biologique rendant compte de la quantité d'hémoglobine dans un globule rouge. Elle représente le poids moyen de l'hémoglobine contenue dans le globule rouge [4]. Elle est déterminée à partir de l'Hb et du NGR par la formule suivante :

Hb Hb en %

TCMH= x 10⁷ TCMH en Pg=10¹² g ou en uu³

NGR NGR en T/L

La TCMH est située entre 28 et 32 Pg.

9

Lorsque la TCMH est supérieur à 32 Pg on remarque dans la circulation sanguine des Globules Rouges de grande taille [4].

I-2-2-3- La Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine

La Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine ou CCMH est la quantité d'hémoglobine contenue dans 100 ml d'hématies. Elle exprime le degré de saturation en hémoglobine des Globules Rouges [9] et est calculée à l'aide de la formule suivante :

Hb Hb en g/dl

CCMH= x 100 CCMH en %

Hte Hte en %

- Lorsque la CCMH est inférieure à la valeur normale, on parle d'hypochromie

- Lorsque la CCMH est comprise entre les valeurs normales, on parle de normochrome.

I-2-3-Les examens complémentaires

Certains examens complémentaires sont parfois nécessaires pour diagnostiquer la physiopathologie de l'anémie (voir les annexes). C'est le cas par exemple du dosage des réticulocytes qui permet d'apprécier le caractère régénératif ou non de l'anémie.

I-3- CLASSIFICATION DES ANEMIES

Les anémies peuvent être classées de plusieurs manières :

I-3- 1- Suivant le degré des anémies

On distingue deux degrés d'anémie

10

- anémie modérée (Hb = 8-11 g/dl) : polypnée et tachycardie à l'effort, asthénie, pâleur

- anémie sévère (Hb < 7-8 g/dl) : polypnée et tachycardie permanentes, souffle systolique, oedèmes, céphalées, vertiges [5].

I-3- 2- Suivant l'étiologie des anémies

On peut distinguer les anémies dues:

- au paludisme ;

- à la drépanocytose ;

- aux déficits en G6PD (Anémie hémolytique) ; - aux intoxications médicamenteuses ;

- aux ictères ;

- aux déficiences immunitaires ;

- Les anémies nutritionnelles qui sont dues à une carence soit en fer, soit en vitamine B12 ou soit en acide folique. Ces carences résultent de la sous alimentation et/ou de la malnutrition ;

- Les anémies post hémorragiques qui peuvent être chroniques ou aigues ; - Les anémies hémolytiques ;

- Les anémies par insuffisance médullaire ;

- Les anémies d'origine infectieuses [11].

I-3-3- Suivant la morphologique des anémies

Au laboratoire, cette classification est plus utilisée. Elle est basée sur l'observation microscopique et les résultats de l'hémogramme. Elle repose sur la morphologie des Globules Rouges. On distingue :

Tableau I: Classification morphologique des anémies [4]

Types d'anémies Nature des constantes

Anémie normocytaire normochrome : VGM normal + CCMH normal

Anémie normocytaire hypochrome : VGM normal + CCMH abaissée

Anémie microcytaire normochrome : VGM abaissé + CCMH normal

Anémie microcytaire hypochrome : VGM abaissé + CCMH abaissée

Anémie macrocytaire normochrome : VGM élevé + CCMH normal

Anémie macrocytaire hypochrome : VGM élevé+ CCMH abaissée

DEXIEMEE PARTIE :

CADRE

MATERIEL ET

METHODE D'ETUDE

13

I- CADRE DU STAGE

Le stage a eu lieu à la Clinique d'Akpakpa.

II- MATERIELS

Comme matériels nous avions utilisé :

- Portoir ;

- Marqueur ;

- Papier absorbant ;

- Tubes EDTA ;

- Echantillons de sang veineux prélevés sur EDTA ; - Automate hématologique BC-2800 ;

- Le logiciel de statistique SPSS.16.

Deux catégories de variables aussi ont été étudiées.

- Variables d'identification : l'âge et le sexe ;

- Variables biologiques : Hb, Hte.

III- METHODE D'ETUDE

III-1-CIBLE DE L'ETUDE

Cette étude a impliqué les patients reçus à la clinique d'Akpakpa pendant la période de

l'étude.

III-2- CRITERE D'INCLUSION

Pour être inclus, il faut :

Importance de l'hémoglobine et de l'hématocrite dans le diagnostic des anémies à la clinique d'Akpakpa.

- avoir entre 15 et 60 ans ;

- avoir été consulté dans l'un service de la clinique d'Akpakpa pendant la période de l'étude ;

- avoir reçu une prescription des examens d'hémogramme, NFS, d'hémoglobine et/ou hématocrite ;

- avoir honoré les frais d'analyses.

Sur cette base 153 patients sont pris en compte.

III-3- MODE OPERATOIRE

- Après étiquetage et prélèvement, les échantillons de sang du jour prélevés sur EDTA et destinés à l'examen de NFS ou Hémogramme, sont collectés.

- Puis on passe tous les échantillons à l'automate hématologique BC-2800.

- Les valeurs du taux d'Hémoglobine et d'Hématocrite sont ensuite enregistrées.

A partir des résultats obtenus, on passe au diagnostic de l'anémie suivant deux méthodes :

· Diagnostic à l'aide des valeurs de l'Hémoglobine ;

· Diagnostic à l'aide des valeurs de l'Hématocrite. III-4- TRAITEMENT STATISTIQUE DES DONNEES

La comparaison du nombre de personnes anémiées suivant les valeurs du taux d'Hémoglobine et suivant les valeurs de l'Hématocrite a été effectuée par un test de Chi 2 avec le logiciel SPSS.16.

RESULTATS

ET

COMMENTAIRES

16

I- RESULTATS

Les résultats obtenus sont résumés dans les tableaux et graphiques ci- dessous

Tableau II : Répartition des patients suivant le sexe et la tranche d'âge

Age [15-

25] [26-35] [36-45] [46-60]

Sexe

TOTAL

MASCULIN

	14 (19,7%)	22(31%)	17(23,9%)	18(25,4%)	71(46,4%)
FEMININ	20 (24,4%)	34(41,4%)	14(17,1%)	14(17,1%)	82(53,6%)
TOTAL	34 (22,2%)	56(36,6%)	31(20,3%)	32(20,9%)	153 (100%)

L'analyse du tableau montre que les femmes représentent 53,6% de l'échantillon contre 46,4% pour les hommes.

En comparant les tranches d'âge, nous constatons qu'au sein de la population cible, il y a plus de patients de 26 à 35 avec un pourcentage de 36,6%

40%

60%

50%

30%

20%

10%

0%

ANEMIES

NON ANEMIES

Graphique I : Diagnostic des anémies en fonction de l'Hémoglobine

Le graphique montre qu'en se basant sur

les valeurs du taux de l'Hémoglobine 55% de la

population cible sont anémiés.

Importance de l'hémoglobine et de l'hématocrite dans le diagnostic des anémies à la clinique d'Akpakpa.

40%

70%

60%

50%

30%

20%

10%

0%

ANEMIES

NON ANEMIES

17

Graphique II : Diagnostic des anémies en fonction de l'Hématocrite

Le graphique montre qu'en se basant sur les valeurs du taux d

e l'Hématocrite 32% des sujets

sont anémiés contre 68% de sujets non anémiés.

II- ANALYSES ET COMMENTAIRES

Le choix des sujets de 15 à 60 ans au cours de notre étude se justifie par la faible fréquentation des sujets de moins de 15ans à la clinique d'Akpakpa. Notre étude a porté sur un total de 153 patients dont 53,6% sont de sexe féminin et 46,4% de sexe masculin ce qui confirme les résultats des études démographiques de la population béninoise.

Le dosage des paramètres (l'Hémoglobine et l'Hématocrite) à été réalisé à l'aide de l'automate hématologique BC-2800 à cause de la fiabilité des résultats qu'il donne.

Dans le cadre de notre étude, le diagnostic biologique de l'anémie à été réalisé en se basant sur les valeurs normales de l'Hémoglobine et l'Hématocrite indépendamment de toute considération clinique.

En considérant les valeurs du taux d'Hémoglobine on relève 55% de sujets anémiés contre 32% de sujets anémiés en considérant les valeurs de l'Hématocrite. Ces considérations révèlent une différence significative entre le nombre d'anémiés reconnus par l'hémoglobine et ceux reconnus par l'hématocrite. Ceci est confirmé par les résultats du test statistique du Chi 2 qui donne : Chi2 =16,29 et P < 0,01.

L'anémie est définie comme la dilution du taux d'hémoglobine avec ou sans diminution du nombre de Globules rouges dans le sang [7]. D'après GNACADJA et DENOU il existe en république du Bénin une forte corrélation entre l'Hémoglobine et l'Hématocrite qui évalue l'hématocrite à sensiblement trois (3) fois le taux d'hémoglobine [12] [13]. Mais avec les résultats obtenus (diagnostic de l'anémie à partir de l'hémoglobine et de l'hématocrite et le test de Chi 2) on se rend compte que cette forte corrélation ne favorise pas un diagnostic juste de l'anémie uniquement à partir des données de l'hématocrite.

CONCLUSION

20

CONCLUSION

Au terme de ce travail qui a pour but de montrer l'importance de l'Hémoglobine et de l'Hématocrite dans le diagnostic de l'anémie à la clinique d'Akpakpa, nous pouvons dire que l'hémogramme est un examen far qui intervient dans la recherche des anémies. On a noté 55% de sujets anémiés suivant les valeurs de l'hémoglobine et 32 % de sujets anémiés suivant les valeurs de l'Hématocrite. Ainsi 23% des sujets reconnus anémiés en se basant sur les valeurs de l'hémoglobine sont révélés normaux en se basant sur les valeurs de l'Hématocrite. On note donc que le diagnostic de l'anémie ne peut se faire en se basant sur les données de l'Hématocrite.

Mais notons que la forte corrélation existant entre l'hémoglobine et l'Hématocrite pourrait permettre de poser un bon diagnostic de l'anémie en se servant de l'Hématocrite comme indice de contrôle de l'hémoglobine.

Les résultats de ce travail préliminaire nécessitent des actions ultérieures. Au regard de ces résultats, nous nous permettons de faire quelques suggestions.

SUGGESTIONS

ET

RECOMMANDATIONS

SUGGESTIONS et/ou RECOMMANDATIONS

Nous recommandons :

4 Aux biotechnologistes:

- De respecter les procédures de dosage de l'hémoglobine pour un bon diagnostic de l'anémie

- de veiller au respect du nombre d'heures d'usage ou d'échantillons à passer par jour

4 Aux responsables de laboratoires :

- De prendre des dispositions pour éviter des ruptures de matériels ou de réactifs qui certaines fois retardent le déroulement du travail dans les différentes sections

- D'initier la maintenance périodique des appareils utilisés dans les sections afin de ne plus assister à la suspension partielle d'un certain nombre d'examens en cours d'exécution.

4 A l'intention des autorités de la clinique :

- De veiller à l'équipement du laboratoire en de bons spectrophotomètre, microscope et automate hématologique pour rendre meilleurs les conditions de travail au laboratoire.

4 A l'intention des autorités de l'EPAC.

- D'augmenter la durée du stage pour permettre à d'autres étudiants de mieux approfondir les problèmes que pose ce sujet.

- D'impliquer activement le personnel du laboratoire d'accueil et principalement leur responsable tout en leur expliquant la conduite à tenir dans l'encadrement.

REFERENCES

BIBLIOGRAPHIQUE

24

REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES

1- L. Mauvieux, « Introduction a l'étude des anémies »

Université Louis Pasteur - Faculté de Médecine - 2005/2006 - DCEM3 - Module 17 - Maladies du Sang et Transfusion

2-E. Le Gall., « Anémies du nourrisson et du grand enfant »

Institut Mère-Enfant, annexe pédiatrique, Hôpital sud, BP 56129, 35056 Rennes Cedex 2

3- Dr P LAHARRAGUE., « Anémies par carence martiale »

(Laboratoire d'Hématologie)

4- TOPANOU A et KLOTOE J R., « Guide des travaux pratiques d'hématologie » UAC/ EPAC/ABM, Bénin 2010

5- Pr Marc Zandecki., « Hématologie biologique » Faculté de Médecine - CHU 49000 Angers France

6- K. Samii, M. Tajeddin et H. Stalder., « ANEMIES »

7- BERNARD J., LEVY J-P., et al. « Hématologie » 9^ème édition MASSON Paris 1998 : 63p

8-LOKO F., « Cours de biochimie clinique. Tome 1 : biochimie médicale analytique » UAC/ EPAC/ABM Bénin 2007-2OO8,

25

9 -TOPANOU A., « cours théorique et pratique d'hématologie » UAC/ EPAC/ABM, Bénin 2OO7-2OO8

10- GODJO C., ODA A., « Comparaison de trois méthodes biologiques de diagnostic de l'anémie chez les enfants de 2 mois à 59 mois dans le service pédiatrique du centre hospitalier départemental du Zou » Mémoire de fin d'étude EPAC/ABM 2003 :82p

11- Fraicette F.HOUNDJO Germaine M.AVOHOU, «Problèmes liés au diagnostic biologique des anémies chez les enfants de 0 a 5 ans : cas de l'hôpital de zone d'Abomey- Calavi. » Rapport de stage de fin de formation pour l'obtention du diplôme de licence professionnelle, ABM/ EPAC/ ABOMEY CALAVI-2009

12- GNACADJA Vignon et DENOU Désiré, « Détermination d'un coefficient de proportionnalité entre le taux de l'hémoglobine et la mesure de l'hématocrite dans le département de Lokossa » Mémoire de fin d'étude, ABM/ CPU/ ABOMEY CALAVI-2001

13- EBO A., MOUNIROU-DEEN H., « Détermination d'un coefficient de proportionnalité entre le taux d'hémoglobine et la mesure de l'hématocrite dans les départements de l'Ouémé et du Borgou »

Mémoire de fin d'études CPU/ABM 2001 : 61p

ANNEXES

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ANNEXES

A- Examens complémentaires [6] Hémogramme

Réticulocytes : une anémie régénérative (réticulocytes > 100 G/l) indique une origine périphérique comme une spoliation ou une hémolyse. Des réticulocytes < 50 G/l en présence d'anémie signifient une origine centrale (carentielle, aplasie médullaire ou érythroïde).

Leucocytes et thrombocytes : une diminution des leucocytes et des thrombocytes avec la présence d'anémie sans augmentation des réticulocytes indique une perturbation au niveau de la cellule souche (anémie aplastique, myélodysplasie ou infiltration de la moelle). Une anémie avec une thrombopénie (et réticulocytose) peut signifier un mécanisme auto-immun (complication de syndrome lymphoprolifératif ou collagénose) ou une microangiopathie.

Frottis du sang périphérique : l'examen des GR sur le frottis sanguin aide fortement au diagnostic pour l'anémie ferriprive (anisocytose se manifestant plus précocement que la microcytose et la diminution de MCHC), plusieurs hémoglobinopathies (thalassémie, drépanocytose) et les anomalies de la membrane érythrocytaire (sphérocytose, ovalocytose, elliptocytose). La présence de neutrophiles hyperségmentés est plus sensible que le MCV pour détecter une carence en acide folique ou vitamine B₁₂, car la macrocytose peut être masquée par une thalassémie ou une carence en fer surajoutées.

Tests sériques :
Ferritine

C'est le meilleur test sanguin pour l'estimation des réserves en fer en raison de la haute sensibilité et spécificité. La ferritine baisse avant le MCV ou l'Hb. La ferritine augmente dans les maladies inflammatoires aiguës ou chroniques, dans certains cancers et dans les maladies hépatiques. D'une manière générale une valeur< 20 jtg/l est diagnostique d'une carence en fer et une valeur de ferritine > 200 jtg/l exclut une carence martiale.

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Fer et la saturation de la transferrine :

Le fer a une variation circadienne pouvant atteindre jusqu'à 30% de la valeur de base. Pour cette raison le dosage du fer est un examen non utile pour le diagnostic de la carence en fer. L'indice de saturation de la transferrine diminue dans l'anémie ferriprive. La transferrine et le fer diminuent dans les états inflammatoires chroniques, les cancers et les hépathopathies. La transferrine augmente en cas de grossesse et lors de l'utilisation de contraception orale. Pour diagnostiquer une carence en fer, le dosage de la ferritine suffit. Il n'est recommandé de doser le fer et la transferrine qu'en présence d'un état inflammatoire surajouté.

Récepteurs solubles de la transferrine (sTfR)

Le sTfR est une forme tronquée du récepteur membranaire qui se trouve à la surface de toutes les cellules (sauf les globules rouges matures). Compte tenu de leurs abondances sur les précurseurs érythroïdes, l'érythropoïèse est l'élément déterminant le plus important des valeurs de sTfR. Ainsi les taux seront abaissés par exemple en cas d'insuffisance rénale chronique, d'aplasie médullaire et, à l'inverse, des taux élevés seront observés en cas d'hémolyse, de polyglobulie. Le nombre de récepteurs à la surface des cellules dépend de l'accessibilité au fer : un déficit en fer induisant une synthèse des récepteurs, et un excès de fer réduisant ce nombre.

Le plus grand nombre se trouve à la surface des précurseurs érythroïdes médullaires. Le taux ne varie pas en fonction du sexe et de l'âge chez l'adulte.

L'intérêt de cette mesure réside dans le fait qu'elle permet, dans les cas difficiles associant un état inflammatoire et une anémie, de déterminer s'il y a réellement une carence martiale surajoutée (auquel cas la valeur du sTfR sera élevée). Le dosage permet aussi de diagnostiquer une carence martiale latente avant que l'anémie s'installe. En cas d'insuffisance rénale associée à une carence en fer, la valeur n'est pas interprétable.

Coloration de fer dans l'aspiration médullaire

Ce test, qui n'est pas recommandé en cas de suspicion de carence martiale isolée, est le plus spécifique et le plus sensible pour le diagnostic de la carence martiale.

Dosage de la vitamine B₁₂ sérique

L'intervalle normal est de 135-700 pmol/l. Le taux de vitamine B₁₂ est à corréler avec la clinique. La B₁₂ est faussement normale ou augmentée dans les syndromes myéloprolifératifs, les maladies hépatiques, une pullulation bactérienne intestinale, et en cas de carence congénitale de transcobalamine II. La B₁₂ est faussement diminuée (normalisation après correction de la cause initiale) dans la carence en acide folique, grossesse, prise de contraception orale et myélome multiple. Dans les cas douteux, on peut confirmer le diagnostic en mesurant les précurseurs de B₁₂ (acide méthylmalonique et homocysteïne).

Dosage de l'acide folique

L'acide folique, varie rapidement en fonction du contenu alimentaire, augmente transitoirement dans la consommation d'alcool et dans la carence en B₁₂. La sensibilité et la spécificité de cette mesure sont donc limitées. L'acide folique érythrocytaire est moins sensible aux variations alimentaires mais reste peu sensible et spécifique en cas de déficit en B12, chez les personnes alcooliques ou pendant la grossesse. En cas d'hémolyse, ce taux est faussement augmenté.

Dosage des précurseurs : acide méthylmalonique (MMA) et homocysteine (Hcy)

Dans la carence en B₁₂, le MMA et l'Hcy augmentent dans 86% et 85% respectivement. Dans la carence en acide folique, uniquement l'Hcy est augmenté. Les taux de MMA et Hcy sont altérés avant le MCV, l'Hb ou les taux de B₁₂ et folate. Il pourrait alors s'agir d'une carence subclinique. En pratique le dosage de MMA dans les urines est quelques fois utile si la valeur de B₁₂ est à la limite inférieure de la norme.

Anticorps anti-cellules pariétales gastriques et anti-facteur intrinsèque (FI)

Les Ac anti-cellules pariétales gastriques ne sont pas spécifiques (50% positifs dans la maladie de Biermer, 3-10% positifs chez des sujets normaux et dans des maladies endocriniennes et auto-immunes). L'Ac anti-FI est spécifique mais peu sensible (60% positifs dans la maladie de Biermer).

30

Test de Schilling

Ce test permet de distinguer l'anémie de Biermer de la malabsorption. L'indication à effectuer ce test est la confirmation d'une anémie de Biermer en cas d'Ac négatifs en raison des risques neurologiques et de cancer gastrique à long terme. Le test se fait en deux étapes [étape1 : donner une dose (05,-1 jig) de B₁₂ marquée au Cobalt 57* per os après avoir donné une forte

dose de B₁₂ non marquée en injection (1000 jig)]. La B₁₂ marquée est dosée dans les urines de 24 h. Si la quantité excrétée est < 7% de celle administrée, le test est répété (étape 2) avec l'ingestion de B₁₂ marquée au Cobalt 57* et le facteur intrinsèque. Si l'excrétion de la B12 marquée augmente, le diagnostic d'anémie de Biermer est posé.

Bilan hémolytique (bilirubine, LDH, haptoglobine, test de Coombs, Hb libre)

Le bilan est indiqué quand il y a une suspicion de destruction accélérée des GR (anémie hyperégénérative sans notion de spoliation). Les tests de Coombs direct et indirect sont utiles pour détecter des anticorps fixés sur la membrane ou circulants. Les causes d'une hémolyse à test de Coombs négatif sont les anomalies de la membrane des GR (sphérocytose), les hémoglobinopathies, les enzymopathies, l'hémoglobinurie paroxystique nocturne (PNH) et les microangiopathies (purpura thrombotiques thrombocytopénique). Le Coombs positif signifie une hémolyse auto-immune à anticorps chauds (extravasculaire) ou une hémolyse à anticorps froids (intravasculaire). L'hémolyse extravasculaire est observée au cours d'une leucémie lymphocytaire chronique, lymphome, infection bactérienne, une maladie auto-immune. Elle peut être idiopathique. L'hémolyse intravasculaire survient lors des infections virales chez les enfants et les adultes ou des infections à Mycoplasma pneumoniae, lors de syndromes lymphoprolifératifs (LLC, Lymphome) ; elle peut aussi rester d'origine inconnue. Dans les cas d'hémolyse intravasculaire la LDH est plus fortement augmentée que dans l'hémolyse extravasculaire. L'hémoglobine libre est aussi plus élevée dans l'hémolyse extravasculaire. Dans ce cas, l'haptoglobine est fortement diminuée ou absente.

Etudes des hémoglobines

La recherche d'une hémoglobinopathie dans les populations à risque (méditerranéens, africains et asiatiques) par électrophorèse d'hémoglobine, le dosage de HbF, HbA et éventuellement la recherche génétique de l'á-thalassémie ne doit pas s'effectuer avant d'avoir exclu une anémie ferriprive, qui est la cause la plus fréquente de l'anémie microcytaire.

I	Femme		Homme
Hémoglobine (g /100 ml)	12,0	- 16,0	14.0	- 18.0
Hématocrite (%)	35,0	- 48,0	40,0	- 55,0

B- Tableau III Répartition des valeurs normales de l'Hémoglobine et de l'Hématocrite utilisé

TABLE DES MATIERES

Listes des enseignants

Dédicaces .

Remerciements....

Hommages

Liste des abréviations

Listes des tableaux et des schémas

Résumé ....

Abstract

Sommaire . .

Introduction

Première partie : GENERALITE

I-1- Anémie .....

I-1-1-Définition

I-1-2- Diagnostic de l'anémie

I-2- Diagnostic Biologique
I-2-1-Description des paramètres biologiques de l'anémie

I-2-1-1-les hématies

I-2-1-2-L'Hémoglobine

I-2-1-3-L'Hématocrite

I-2-2- Description des constantes érythrocytaires

I-2-2-1- Le volume globulaire moyen ...

I-2-2-2- La teneur corpusculaire moyenne en Hémoglobine

I-2-2-3- La concentration corpusculaire moyenne en Hémoglobine

I-2-3- Les examens complémentaires

I-3- Classification des anémies

I-3-1-Suivant le degré des anémies

I-3-2- Suivant l'étiologie des anémies

I-3-3- Suivant la morphologie des anémies

Deuxième partie : CADRE MATERIEL ET METHODE D'ETUDE

ii iv

vii

ix

xi

xiii

xiv

xv

xvi

xvii

2

3
3

5
3

5

6

6

7

8

8

8

9

9

9
9

10

10

12

32

33

I- Cadre de stage

	.13
I-1- Historique et situation géographique de la clinique	13
I-2- Présentation de la clinique d'Akpakpa	13
I-2-1- Les services administratifs	14
I-2-2- Les services médico-techniques	14
I-3- Présentation du laboratoire d'analyses médicales	15
I-3-1- Description des locaux	.15
I-3-2- Description des ressources du laboratoire	15
I-3-3- Fonctionnement du laboratoire	17
II- Matériels	20
III- Méthode d'étude	.20
III-1- Cible de l'étude	.20
III-2- Critère d'inclusion	21
III-3- Mode opératoire	..21
III-4- Traitement statistique des données	..21
Troisième partie : RESULTATS ET COMMENTAIRES	22
I- Résultats	23
II- Analyses et Commentaires	.25
Conclusion	.26
Suggestions et/ou Recommandations	28
Références bibliographiques	..30
Annexes	33
TABLE DE MATIERES	.39