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Hépatite virale B: intérêt de l'utilisation des échantillons de sang séché dans l'extraction de l'ADN viral

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par Séraphin Twarigimana
Université Marien Ngouabi faculté des sciences de la santé - doctorat en médecine 2008
  

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5.2. Analyses sérologiques

5.2.1. Ag HBs

L'Ag HBs a été réalisé avec la technique de MONOLISA test HBs ultra (BIO-RAD, France). C'est une technique immuno-enzymatique de type « sandwich » en un temps utilisant des anticorps monoclonaux et des anticorps polyclonaux sélectionnés pour leur capacité à se lier aux différents sous-types de l'Ag HBs et la plupart des souches variantes de l'hépatite B.

Tous les 20 échantillons ont été traités avec le même protocole (annexe 2) et les résultats interprétés de la manière suivante :

La valeur seuil a été calculée en utilisant la formule suivante :

VS= DO R3+ 0, 050

Avec :

- VS : Valeur Seuil

- DO R3 : Densité optique moyenne du contrôle négatif (Fourni).

La valeur seuil a été donc de 0,050.

Les ratios ont été calculés selon la formule suivante :

Pour chaque échantillon : Ratio = DO échantillon/VS

Ainsi les échantillons dont le ratio est inférieur à 1 sont considérés négatifs et les échantillons dont le ratio est supérieur ou égal à 1 ont été considérés comme initialement positifs avant d'être retestés en double pour l'interprétation finale.

La spécificité de ce test est estimée à 99,94% et la sensibilité à 100%.

Pour l'interprétation, 3 groupes ont été constitués en fonction du taux de ratio de l'Ag HBs, en intervalle de 1]1 - 2] ; ]2 - 3] et ]3 - 4].

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"Un démenti, si pauvre qu'il soit, rassure les sots et déroute les incrédules"   Talleyrand