II- Méthodes d'étude
Deux enquêtes de terrain ont été
effectuées en février et en septembre 2002.
1- Echantillonnage des moustiques adultes
Deux techniques d'échantillonnage de moustiques adultes
ont été utilisées: la capture aux pièges lumineux
et la collecte de la faune au repos dans les habitations humaines.
1-1. Captures aux pièges lumineux
En raison d'un phototactisme positif, l'échantillonnage
des populations de moustiques peut être effectué à partir
de captures aux pièges lumineux. Des pièges de type CDC (Center
of Disease Control, Atlanta) associés avec un dormeur sous moustiquaire
ont été utilisés. Les moustiques attirés par la
lumière et/ou le dormeur, sont aspirés par un ventilateur et
expulsés dans une cage en tulle. Les pièges ont fonctionné
de 19 heures à 6 heures du matin. Le piège est composé
d'une nasse en tulle moustiquaire. L'ouverture de la nasse est reliée
à un système d'aspiration muni d'une source lumineuse. L'ensemble
est alimenté par une batterie de six volts. Les pièges ont
été placés à 1,50 m du sol, au dessus de la
tête du dormeur sous moustiquaire. Dans chaque localité, 18
pièges ont été utilisés par nuit et ont permis de
collecter les moustiques au cours de 3 séances consécutives de
capture durant chaque enquête, soit un total de 36 pièges-nuits
pour les deux enquêtes effectuées dans chaque localité au
cours de l'étude.
1-2. Récolte de la faune matinale
résiduelle
Cette méthode d'échantillonnage consiste
à collecter les moustiques dans leurs lieux de repos, tôt le matin
avant l'ouverture des portes et fenêtres des chambres et salons
sélectionnés la veille. La technique utilisée est celle
des récoltes après pulvérisation de pyrèthre.
Après avoir recouvert le plancher de draps blancs et fermé toutes
les issues de la pièce, on procède à une
pulvérisation de pyréthrinoïdes (YOTOX®). Au
bout de 10 minutes d'attente, les moustiques tombés sont
prélevés à l'aide de pinces souples dans des boîtes
de pétri. Sur chaque boîte sont reportés un numéro
et un indice correspondant respectivement à la localité et
à la chambre. Dans chaque localité, 10 chambres ont
été prospectées lors de chacune des deux enquêtes,
soit un total de 20 chambres prospectées par site pendant les deux
enquêtes.
2. Echantillonnage des stades pré-imaginaux de
moustiques
La méthode du "dipping" a été
utilisée pour la récolte des larves et nymphes de moustiques.
Elle a consisté à donner 50 coups de bac (0,75 litre d'eau) dont
25 au bord et 25 au milieu du gîte larvaire. Les larves et nymphes
récoltées ont été dénombrées en
fonction du genre (Anopheles, Culex et Aedes) et des
stades.
3. Traitement et conservation du matériel
récolté3-1. Traitement sur le terrain
3-1-1. Identification des moustiques adultes
Sur le terrain, les moustiques capturés ont
été identifiés morphologiquement sous la loupe binoculaire
à partir de clés de détermination (GILLIES &
DE MEILLON, 1968 ; GILLIES & COETZEE, 1987 ; HUANG, 2001).
3-1-2. Conservation des moustiques adultes
Après identification, les moustiques adultes
récoltés ont été placés individuellement
dans des tubes numérotés contenant du silicagel.
3-1-3. Conservation des stades
pré-imaginaux
Pour chaque gîte, les larves de moustiques
récoltées au cours des séances de prospection larvaire ont
été conservées dans des tubes à hémolyse
bouchés contenant de l'alcool 70°. Le lieu et la date de capture
des larves ont été indiqués sur les tubes. Les larves
d'Anophelinae ont été séparées de celles
de Culicinae.
3-2. Traitement au laboratoire
Les larves de moustiques de stade 3 et 4 ont été
montées au laboratoire entre lame et lamelle et
déterminées sous le microscope.
3-2-1. Montage des larves de moustique
- Sur une lame porte objet, déposer une goutte de PVA
(Polyvinylalcool). - Prélever une larve de stade 3 ou de stade 4.
- Déposer la larve à disséquer sur la goutte
de PVA.
- Couper au niveau du dessus du peigne siphonal.
- Disposer les peignes en exergue.
- Recouvrir la larve d'une lamelle.
- Inscrire au crayon sur la plage polie de la lame le lieu, la
date et le gîte prospecté. - Garder dans une étuve à
30 ou 35°C pendant 72 heures.
- Identifier au microscope.
3-2-2. Identification des Larves de
moustiques
Les larves montées entre lame et lamelle ont
été morphologiquement identifiés (genre et espèce)
sous la loupe binoculaire à partir de clés de
détermination (GILLIES & DE MEILLON, 1968 ; GILLIES &
COETZEE, 1987 ; HUANG, 2001).
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